细胞培养
细胞培养的优点
1. 细胞培养的概念:细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生🐍 物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是数传沉制输细胞的大规模克隆。
2. #1.组织培养:诱发产生愈伤组织,如果条件适宜,可培养出再生植株。用于研究植物的生长发育、分化和遗传变异;进行无性繁殖;制取代谢产物。 #2.悬浮细胞培养:在愈伤组织培养技术基础上发展起来的一种培养技术。适合于进行产业化大规模细胞培养,制取植物代谢产物。
3. 动物细胞培养原理是细胞增殖。动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶),放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。细胞培养是指细胞在体外条件下的生长,动物细胞视蒸万在单独细胞培养的过程中不再形成个体。
细胞培养
1. 以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性着,所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: DHanks 液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶果班日垂研差对细胞的作用。
2. 1、能长期传代,保持活性,便于监控检测结构功能和生命活动。 2、培养条件可以人为的控制便于研究🍈 细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响 3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化)。差诉可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。
3. 为了维持培养基pH的相对恒定。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降,若不对培养基pH条件进行控制,会导致培养基pH发生变化;如果培养基中OH浓度增加,细菌与放线菌适于在pH77.27。
培养细胞基的PH值怎么测定
1. 应考虑:培养料的性质和配比,高温灭菌后pH会有所降低,食用菌在生长过程会产生某些有机酸使pH下降,有些培养料在堆制发酵过程中微生物的活动也会使培养料的pH改变。所以,培养料需高温灭菌的,应先将其pH略调高。
2. 为了在培养过程中使培养基的pH能维持在适宜范围内,常在培养基中添加一定的缓🥕 万博体育(manbetx)官方网站冲剂。常用的磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钾(K2HPO4)等无机盐,除能供给食用菌以磷、钾等矿质营养外,还能对pH的变化起缓冲作用。钙(Ca)不但能中和酸性,而且还有增强菌丝耐酸的作用。
3. 当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降,若不对培养基pH条件进行控制,会导致培养基pH发生变化;如果培养基中OH浓度增加,细菌与放线菌适于在pH77.2激映照扬决试副么7。值得注意的是.细胞培养🧩 万博体育(manbetx)官方网站基PH值一般为7。
细胞传代培养取苦吃吧功攻施资下的步骤?
1. 传代细胞的培养步骤如下: (1)人无菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒双手; (2)细胞传代前先在倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数观察; (3)打开超净工作台的紫外灯照射台面30 min左右,关闭超净工作台的紫外灯,打开抽风机清洁空气,除去臭氧。
2. 1、附着型胞(adherentcell) (1)吸掉旧培养液。 (2)用DPBS洗涤细胞一至二次。 (3)加入trypsinEDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2),37℃石地作用数分钟,于倒立显微镜下观察,当细胞将要分离而呈现圆粒状时,吸掉trypsinED植给满毫切此TA溶液。
3. 有些hybridomacell需培养三天以上才会产生抗体,若是更换培养基,则可能资只坏长重误初汽专末会失去抗体。因此继代节印仅培养不需离心后更换培养基,直接添加新鲜培养基稀八老但释细胞浓度即可。若体积太大,可倾斜放置,或分殖至新培养瓶中。扩展资料:传代方法:1、悬浮生长细胞传代多采用离心法传代。