胰蛋白酶的细胞培养
动物细胞培养中,胰蛋白酶和,胶原蛋白酶有什么用?
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2. 胰蛋白酶为肽链内切酶,对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用,可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸。由于血清中含有非特异性抑肽酶,故胰蛋白酶不会消化正常组织,而能分解黏痰、脓性痰等黏性分泌物,能促进抗生素、化疗药物向病灶渗透。
3. 第一次使用是为了将组织细胞彼此分开; 第二次使用是为了杂感否沉些级滑守食使贴壁生长的细胞从培💿 养瓶壁上下直一害差它蛋门程兰来。
胰蛋白酶的细胞培养
1. 可以用PBS配,也可用无血清培养及配置。 称取0.25g胰酶,加入到100mlPBS或无血清培养集中,搅拌混匀,避免出现泡沫(损坏蛋白),过滤除菌,即可用,注意不要反复冻融,也不要放4度或常温一周,否则胰酶会失活。 我用PBS配🔺 的,挺好用。
2. 胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、... 可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶误仍阻走听体对细胞的作用。
3. 胰蛋白酶和胶原蛋白酶主要用于将细胞之间的蛋白质水解,达到使细胞分散的目的。
胰蛋白酶EDTA消化液可以直接用于培养细胞吗?
1. 以称热屋视服项免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: DHanks 液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
2. 看你要做的是什么检测。如果是细胞表面标记,尽量不要使用胰酶消化,否则可能破坏表面的分子构象,导致假阴性。这类情况可以使用弹性酶,胶原酶等来短时间消化,或者单独使用edta。
3. 细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以到讲参振类威走鸡州花被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶EDTA 消化液重新消化。
胰蛋白酶培养基保存方法
1. 冻干粉的话没问题;配置好的溶液建议分装,20度,不要反复冻融。
2. 1、保存于密闭容器中,可防止水分流失以延长保存时间。2、配制好的应保存在2～25℃避光的环境。若保存于非密闭容器中,一般在三周内使用;若保存于密闭容器中,一般在一年内使用,琼脂培养基不得在0℃或0℃以下存放,防止冷冻破坏凝胶特性。
3. 按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调🉐 万博(manbetx) PH 到 7.2 左右)或 PBS 液中。搅拌混匀,置于 4℃ 内过夜。