如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养
如何从杂交瘤细胞中获取抗体基因
1. 答案D 杂交瘤细胞是由小鼠的一个B淋📀 万博(manbetx)巴细胞(经免疫)与骨髓瘤细胞融合而成的.。
2. 如何从杂交瘤细来自胞中获取抗体基因 原因比较多,首先你要确定你师兄是不是从该杂交瘤获得的抗体,获得的抗体量多不多?然后,如果确实是这株杂交瘤,那么你要从两方面着手:一,富集一下上清里面的抗体或者考虑下抗原的包被量,有可能是上清里的抗体量少(上清检测你稀释过没?);二,再对.振伤省帝路保..。
3. #利用B细胞产生特异性抗体的能力与骨髓瘤细胞的无限生长能力,将两者融合形成杂交瘤细胞,对杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内可获得大... 由于变异的瘤细胞不具有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧🔺 万博(manbetx)啶核苷激酶,不能利用相蒸管酸地回再培养基中的次黄嘌呤或胸腺嘧啶核苷而合成DNA,只能利用谷。
单克隆抗体的克隆化方法
1. #单克隆抗体制备方法:#(1)太外培养法:体外使用旋转培养管大量培养杂交瘤细胞,从上清液中获取单克隆抗体.一般包括悬浮培养法和固相培养法。
2. 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗刘著事结真国鸡事体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
3. 只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释具类既宣法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗... 均一的抗体。3、由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法。
如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养
1. B 解析:阳性杂交瘤细胞的克隆化(单个细胞培养)方法包括有限稀释法、显微操作法、荧光激活细胞分选仪、软琼脂平板法 。
2. 然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体,那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。 阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞,挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释,一般需进行3～4次,直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。
3. [正确答案] A[答案解析] 杂交瘤细胞形成后的初期很不稳定,为确保单克隆抗体的专一性及避免其他阴性细胞对其生长的影响,必须将阳性杂交瘤细胞进行单细胞分离培养,产生单克隆杂交瘤细胞,经23次检测均为阳🈯 性的杂交瘤单个细胞,才能进行克隆化培养。
多孔培养基怎么筛选出需要的杂交瘤细胞?
1. 选择性培养基:根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是志型京考指杆里水斤运使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。
2. 从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的,经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也🐸 存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞。
3. HAT 培养基筛选杂交瘤细胞的原理 HAT 培养基是指含有次黄嘌呤( hypoxantin )、氨基蝶呤( aminopterin )和胸腺嘧啶脱氧核苷( thymidin )三种物质的细胞培养基。